Nauka innov. 2015, 11(5):67-75 
https://doi.org/10.15407/scin11.05.067

М.Т. Юрків1, О.О. Куриленко1, Р.В. Василишин1, К.В. Дмитрук1, Н.Б. Мартинюк2, В.В. Скороход2, А.А. Сибірний1
1Інститут біології клітини НАН України, Львів
2Приватне акціонерне товариство «Ензим», Ладижин

 

Розробка технології отримання препаратів глутатіону на основі сконструйованих активних суперпродуцентівцього трипептиду у дріжджів

Розділ: Науково-технічні інноваційні проекти Національної академії наук України
Мова статті: українська
Анотація: За допомогою метаболічної інженерії сконструйовано штам метилотрофних дріжджів Hansenula polymorpha з посиленою експресією генів GSH2, що кодує γ-глутамілцистеїнілсинтетазу, та MET4, що кодує транскрипційний активатор генів біосинтезу цистеїну (попередник синтезу глутатіону). Отриманий рекомбінантний штам характеризується підвищеною продуктивністю синтезу глутатіону порівняно із штамом дикого типу в лабораторних умовах. Було проведено оптимізацію синтезу глутатіону сконструйованого рекомбінантного штаму H. polymorpha. Розроблено напівпромислову модель технології отримання глутатіону з використанням сконструйованого дріжджового штаму-продуцента.
Ключові слова: глутатіон, дріжджі, Hansenula polymorpha, метаболічна інженерія.

Повний текст (PDF)

Література:
1. Penninckx M.J. A short review on the role of glutathione in the response of yeasts to nutritional, environmental, and oxidative stresses // Enzyme Microb Technol. — 2000. — 26. — P. 737—742.
2. Pocsi I., Prade R., Penninckx M. Glutathione, Altruistic Metabolite in Fungi // Advances in Microbial Physiology. — 2004. — V. 49. — P.13—86.
3. Li Y., Wei G., Chen J. Glutatione: a review on biotechnological production // Applied Microbiology and Bio technology. — 2004. — P. 305—315.
4. Gellisen G. Hansenula polymorpha — biology and applications. — Weinheim: Wiley VCH; 2002.
5. Ubiyvovk V.M., Ananin V.M., Malyshev A.Y. et al. Оptimization of glutathione production in batch and fedbatch cultures by the wild-type and recombinant strains of the methylotrophic yeast Hansenula polymorpha DL-1 // BMC Biotechnol. — 2011. — V. 11. — P. 8.
6. Sambrook J., Fritsh E.F., Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory // Cold Spring Harbor, New York. — 1989.
7. Faber K.N., Haima P., Harder W. et al. Highly-efficient electrotransformation of the yeast Hansenula polymorpha. Curr Genet. — 1994. — 25. — P. 305—310.
8. Griffith O., Mulcahy R. The enzyme of glutathione synthesis: γ-glutamylcysteine synthetase //Advances in enzymology and related aress of molecular biology. — 1999. — V.73. — P. 209—267.
9. Grabek-Lejko D, Kurylenko O.O, Sibirny V.A. et al. Alcoholic fermentation by wild-type Hansenula polymorpha and Saccharomyces cerevisiae versus recombinant strains with an elevated level of intracellular glutathione // J. Ind. Microbiol Biotechnol. — 2011. — 38(11). 1853—9.
10. Taxis C., Knop M. System of centromeric, episomal, and integrative vectors based on drug resistance markers for Saccharomyces cerevisiae. BioTechniques. — 2006. — 40. — P. 73—78.
11. Wang Z., Tan T., Song J. Effect of amino acids addition and feedback control strategies on the high-cell-density cultivation of Saccharomyces cerevisiae for glutathione production // Process Biochemistry. — 2007. — 42. — P. 108—111.